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實(shí)驗(yàn)時(shí)怎樣才能挑選到適合自己試驗(yàn)的抗體

更新時(shí)間:2023-05-11      點(diǎn)擊次數(shù):1108
  關(guān)于特異性的選擇:特異性的選擇首要需求考慮四個(gè)方面:蛋白特異性、實(shí)驗(yàn)方法特異性、符號(hào)物的特異性、種屬特異性。
 
  1、蛋白特異性:針對(duì)需求檢測(cè)的蛋白查找抗體,幾個(gè)細(xì)節(jié)要差異,重組表達(dá)的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測(cè),對(duì)抗體的要求是不相同的,留心檢查抗體闡明書(shū)的檢測(cè)闡明。假定重組蛋白不是全長(zhǎng)表達(dá),則需求留心抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。
 
  2、符號(hào)物的特異性一般根據(jù)實(shí)驗(yàn)操作的實(shí)驗(yàn)方法不會(huì)運(yùn)用帶有符號(hào)的一抗,比方WB、IHC等,都是通過(guò)二抗類(lèi)的試劑符號(hào)抵達(dá)效果出現(xiàn)的目的。
 
  可是根據(jù)儀器剖析的一些實(shí)驗(yàn),或許就會(huì)運(yùn)用到直接符號(hào)的一抗,比方流式實(shí)驗(yàn)。那么需求了解到自己行將運(yùn)用的儀器能檢測(cè)到的熒光規(guī)模,不通的參數(shù)要求選擇對(duì)應(yīng)的符號(hào)物。在免疫熒光雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)中,需求選配不同的熒光物。
 
  3、實(shí)驗(yàn)方法特異性:現(xiàn)在運(yùn)用抗體的實(shí)驗(yàn)方法有許多,不同的運(yùn)用方法過(guò)程中,由于對(duì)蛋白樣品的處理方法不相同,蛋白的含量有差異,對(duì)抗體的辨認(rèn)表位和效價(jià)要求都是不相同的。具體的根據(jù)闡明書(shū)注明的產(chǎn)品應(yīng)用方法進(jìn)行選擇。
 
  4、種屬特異性:同種蛋白不同物種,有著或大或小的差異?,F(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的,根據(jù)蛋白的同源性的情況與其他種屬發(fā)作穿插反應(yīng)。需求參照闡明書(shū)注明的可反應(yīng)種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體,能夠通過(guò)蛋白的序列比對(duì),選擇同源序列免疫的抗體。
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